UVP 紫外交联仪
UVP 紫外交联仪---基于紫外原理的应用拓展
紫外简介
紫外线是跨100-400 nm的电磁光谱的一部分。 紫外线光谱分为三类:UVA,UVB和UVC(Table 1)。 在光线通过大气层到达地球表面的过程中,短波UVC会被分子氧吸收,而长波UVA和中波UVB则可穿过大气到达地球表面。
任何经历过晒伤的人都可证明紫外线对人体的危害。尽管如此,从对生命科学的基本研究到临床卫生设施消毒杀菌等,紫外在协助改善人类健康方面依然功不可没。
Table 1. 紫外波长
UV 常见分类 | 波长范围 (nm) | UVP Crosslinker, CL-3000 波长 (nm) |
UVA | 315-400 | 365 |
UVB | 280-315 | 302 |
UVC | 200-280 | 254 |
Vacuum UV | 100-200 | NA* |
*Analytik Jena无Vacuum UV相关紫外产品
120年前,紫外线就已被用于防止物体表面微生物的生长,空气中微生物的破坏以及液体灭菌。例如,自1877年以来,人类就将紫外线用于食品的保存/消毒。 1930年代,手术室开始使用紫外线对空气进行消毒。自二十世纪以来,紫外线已用于对饮用水进行消毒。上述应用中均利用了紫外线的生物毒性。
在分子水平上,在紫外线照射下,核酸链中相邻的嘧啶可发生二聚化,主要发生在胸腺嘧啶碱基之间。 近一百年来,研究人员一直利用紫外线的这种特性作为研究基因突变的工具。 实际上,如果早先尝试利用紫外线的诱变特性,那么紫外线诱发的突变(而非X射线诱发的突变)将与赫尔曼·穆勒(Herman Muller)1928年具有里程碑意义的飞行实验有关,后来该实验获得了1946年诺贝尔奖-毕竟, 紫外线在他的职业生涯后期成为实验室中的流行策略。 但可惜的是,研究人员迟迟未能确定赋予诱变特性的最佳紫外光波长(即254 nm或UVC)。
在穆勒(Muller)具有里程碑意义的工作发生之前大约十年,研究人员观察到滴定的蛋白质溶液可在紫外光的照射中产生凝结。蛋白质研究人员后来了解到导致产生这种凝结的潜在机制是色氨酸残基的改性和二硫键的破坏。总而言之,这些发现为分子和细胞生物学以及其他领域中基于紫外线的应用铺平了道路。
自1993年以来,我们一直使用UVA,UVB和UVC光制造UVP紫外交联仪,以覆盖图1中概述的一系列紫外应用。
这些应用包括:
※ 突变生物学(紫外线诱导的突变,存活率测定,压力测定)
※ 膜交联(Northern/Southern blotting, EMSA)
※ 双分子交联(CLIP-seq, iCLIP-seq, PAR-CLIP-seq, pBpa, sulfo-SDA, psoralen)
※ 微生物灭活(例如细菌,真菌,病毒)
※ 聚合物固化(例如水凝胶,甲基丙烯酸甲酯树脂)
※ 光稳定性验证
Figure 1. 紫外交联仪应用分类
这些应用依赖于高强度,可重现的紫外照射。 我们的最新型号:UVP紫外交联仪CL-3000(图2A),采用内置的辐射计进行紫外能量测量,该辐射计已按照NIST溯源标准进行了校准-无论空间和时间如何,均可确保照射量一致。 此外,CL-3000可以发出高达10 J/cm2的累积能量。 通过使反射罩和紫外线源靠近样品,以实现高度均匀的辐照(图2B和2C)。 整个辐照表面的变化系数为17.3%,而辐照面的中心为6.0%。 与我们所有的仪器一样,用户的安全至关重要,我们所有的交联仪均装有安全联锁装置,以防止紫外泄露。
UVP Crosslinker CL-3000 使用
UVP交联仪CL-3000能够以时间或能量/剂量(mJ / cm2)两种模式提供用户输入。 考虑到灯泡的寿命以及环境变量会影响紫外线输出,因此我们建议用户首选能量模式进行实验。 在科学文献中,用户会发现两者都被使用了。 若文献中标注了能量照射量,则用户可以简单地转换为mJ / cm2(仪器输入的度量单位)。 示例转换如后图所示。
Figure 2. 254 nm UVP紫外交联仪的均匀性。
A)UVP CL-3000紫外交联仪主机照片。
B)以总焦面(Total CV)和照射面中心(Center CV)的形式描述了集成辐射计读数的位置,单位为mJ / cm2,具有尺寸和报告的变异系数(CV)计算。
C)辐射计读数的箱须图摘要。 总CV:平均值= 104.9,标准差= 18.16; 中心CV:平均值= 117.9,标准差= 7.1。 我们建议用户将样本放在照明表面的中心。 放置在中心的样品将至少接收输入能量剂量。 如果用户要将样品放在最前面和最后面的位置,我们建议购买254nm UVP辐射计(P / N 97-0015-02)和传感器(97-0016-01)来校准剂量。
如果报告了输出的照射功率,通常以μW / cm2为单位,则该值将伴有曝光时间。 用户将需要将Fluence Rate转换为mW /cm2(请参见表2中Fluence Rate下的示例转换)。 此外,需要将曝光时间转换为秒(例如10分钟= 600秒)。 请参考下列的示例及计算。
示例
将甲流病毒在1000uw/cm2的紫外环境中曝光10min。将此报告中的紫外线剂量转换为mJ/cm2。
公式 1.
能量单位换算
μJ/ cm2 | mJ/cm2 | J/cm2 | J/m2 |
1,000,000 | 1,000 | 1 | 10,000 |
功率单位换算
μW/cm2 | mW/cm2 | W/cm2 | W/m2 |
1,000,000 | 1,000 | 1 | 10,000 |
Table 2. 紫外辐照能量单位的重要换算
*文献中的值通常以mJ / cm2或J / m2的通量进行报告。 在某些情况中,Paper中会用功率单位描述通量(例如μW / cm2),在这种情况下,用户应使用公式1确定通量(或剂量)。
样本放置位置
实验中,我们建议用户将样本置于辐照面中间位置,居中位置的CV值较小(6%) (Figure 2B, 2C). 放置在中心的样品接受输入能量的剂量损失较小。由于边缘效应,放置在最前和最后位置的样品接收的辐照剂量将少于输入剂量。 如果用户要校准边缘的紫外强度,我们建议购买254 nm的UVP辐射计(P / N 97-0015-02)和传感器(97-0016-01),以确定照射面上的最低紫外强度。 例如,当我们输入100 mJ / cm2时,图2B将最前面和最右边的位置显示为最低强度(78.18 mJ /cm2)。 因此,用户可以考虑输入更高强度(例如125 mJ / cm2)以抵消边缘效应。
技术参数:
项目 | CL-3000 |
波长 | 254 nm, 302 nm, 365 nm |
灯管 | 6 x 8 Watt |
能量范围 | 0000.1 - 9999.9 mJ/cm² (0 - 10 J/cm²) |
时间范围 | 000:01 - 999:59 mmm:ss (>300J/cm²) |
工作温度 | 15⁰C - 35⁰C |
工作湿度 | 70%无冷凝水 |
适用海拔海拔 | 0-3000m |
工作噪音 | ≤ 50 dba |
外壳表面温度 | ≤ 30⁰C |
启动时间 | < 1 sec |
外部尺寸 (L x W x H) | 41cm x 40cm x 26.5cm |
内部尺寸 (L x W x H) | 35cm x 27cm x 16cm |
重量 | 6.8Kg: 15 lb |
电源配置 | 100 - 115VAC & 230VAC 50/60Hz |
认证 | CE, RoHS (CSA In Process) |
订货号:
货号(230V) | 描述 |
849-95-0615-02 | UVP紫外交联仪 (CL-3000), 254 nm |
849-95-0615-04 | UVP紫外交联仪 (CL-3000), 302 nm |
849-95-0615-06 | UVP紫外交联仪 (CL-3000), 365 nm |
34-0007-01 | 替换紫外灯管,8W,254nm |
34-0042-01 | 替换紫外灯管,8W,302nm |
34-0006-01 | 替换紫外灯管,8W,365nm |
CL-1000开门型紫外交联仪
1.可预设或手动调节紫外强度和曝光时间
2.最高UV能量设置可达999.9mj/cm
3.5个254nm的短波紫外灯管
4.LED显示时间/能量
5.紫外安全门锁设计
6.紫外安全视窗
CL-1000L 型 365紫外灯管
CL-1000M 型 302紫外灯管
内部尺寸 254x127x305mm
外部尺寸 396x216x348mm
选配件:
CL-1000 34-0042-01 302nm紫外灯管
CL-1000M 34-0007-01 254nm紫外灯管
CL-1000L 34-0006-01 365nm紫外灯管
应用:
核酸的膜固定、EB染色的DNA缺刻、利用胸腺嘧啶二聚体抑制切割进行基因作图、检测recA 功能、紫外灭菌、PCR污染消减等
CX-2000抽屉型紫外交联仪
1.可预设或手动调节紫外强度和曝光时间
2.最高UV能量设置可达999.9mj/cm
3.5个254nm的短波紫外灯管
4.LED显示时间/能量
5.紫外安全门锁设计
6.紫外安全视窗
内部尺寸 287x 83x287mm
外部尺寸 445x241x381mm
应用:
核酸的膜固定、EB染色的DNA缺刻、利用胸腺嘧啶二聚体抑制切割进行基因作图、检测recA 功能、紫外灭菌、PCR污染消减等